P2实验室是用于初步的生物安全实验，国标明确了相应要求，适用于对人和环境有中等潜在危害的微生物。P2实验室主要用于初级卫生服务、诊断和研究，其实验对象的危害等级为Ⅱ级（中等个体危害，有限群体危害），具体定义为“能引起人类或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病源体”，代表病原体：流感病毒。其操作必须严格控制管理制度执行，以确保实验室的安全。

一、目的

　　加强P2实验室生物安全管理，规范实验人员仪器设备、实验操作行为，确保P2实验室工作安全运行。

二、适用范围

　　适用于P2实验室的管理与操作。

三、职责

　　1、主管部门：学院实验室管理中心。

　　2、实验人员：严格执行P2实验室相关管理规定，规范操作行为。

　　3、实验室负责人：监督执行P2实验室相关管理规定，定期抽查P2实验室管理规定的执行情况，及时纠正违规操作行为，发现并解决P2实验室运行中出现的问题，发现不安全隐患及时上报。

四、准入要求

　　1、只有经过学院授权的申请人员才允许进入P2实验室工作区。

　　2、16岁以下人员禁止进入P2实验室工作区。

　　3、实验人员要接受相应预防性生物制品的免疫接种。

　　4、禁止将无关动物带入实验区。

　　5、外单位人员来访、参观、进修，必须经中心主管部门批准，未经批准不得进入P2实验室工作区。

　　6、外来人员进入P2实验室，须由本室负责人陪同，在严格遵守有关规定的条件下方可进入，同时填写《外来人员进出实验室特殊区域登记表》。

　　7、限制免疫耐受者进入实验室。

　　8、限制正在接受免疫抑制剂者进入实验室。

　　9、严禁在实验室内吸烟、饮食、化妆等。

五、进入程序

　　1、进入P2实验室，伸手打开缓冲间内空调和生物安全柜按钮，使实验室和生物安全柜净化10分钟以上，方可进入实验室进行实验。

　　2、将实验所需材料和物品放入生物安全柜中。

　　3、进入P2实验室缓冲区，关闭外门，在工作服外加穿P2实验室专用罩衣（紧口，后系带），戴一次性口罩、帽子和戴两层手套，换穿P2实验室专用鞋。需要时打开照明按钮。

　　4、进入实验室工作区，首先打开照明按钮，打开前玻璃门，调节到要求的高度。将实验所需物品一次性放入实验台内，摆放要有秩序且要相对区分清洁物与污染物，净化生物安全柜10分钟左右。

　　5、观察实验区负压表指示数值是否在工作要求范围内，如不能满足要求则进行负压调节。观察温湿度计，填写温湿度计使用记录。

　　6、实验人员手臂放进生物安全柜内大约1分钟后，即可按无菌要求进行实验操作。

　　7、完成整个实验操作后，将使用过的物品进行分类处理。消毒整个工作台面，再让排风至少运行10分钟。

　　8、放下前玻璃门，打开生物生物安全柜紫外线灯进行消毒。

　　9、离开实验操作区前脱去第二层手套放到指定容器内消毒处理。

　　10、填写仪器使用记录。

六、实验后物品、污染物处理

　　1、对不可回收的污染物品小心包扎后，在高压灭菌器内按规定要求进行高压灭菌处理。然后按医用垃圾交实验室管理处统一处理。

　　2、对可回收的污染物品小心包扎后，在高压灭菌器内按规定要求进行高压灭菌处理。之后转入洗刷间进行洗刷。

　　3、对一次性实验用品放入容器内高压灭菌，然后按医用垃圾交中心统一处理。

　　4、对不可高压灭菌处理的物品，应选择适当的消毒剂进行浸泡消毒。可回收的物品，送洗刷室；不可回收的物品，按校实验室管理处“三废”处理的有关规定执行。

七、出实验室程序

　　1、打开实验室内门，出来后随手关闭。将实验室专用罩衣脱下，挂在缓冲区，待稍后进行紫外线消毒。脱掉一次性帽子、口罩和手套，放入待消毒的垃圾筒内，按门锁按钮，打开外门，更换拖鞋，打开紫外线按钮，同时关闭排风按钮，然后关闭外门。注：若进入时打开照明，则此时应关闭。

　　2、如实验过程中在传递窗传递过污染性物品，在实验后应进行紫外线消毒。

　　3、待消毒完毕后（至少30分钟），关闭生物安全柜和紫外线按钮。

八、注意事项

　　1、应保持实验室环境清洁。

　　2、工作台内部空间需用消毒剂擦洗，如消毒剂具有腐蚀性，要用自来水清洗台面，以避免腐蚀。

　　3、操作台内的实验器具应避免阻挡前后的穿孔网格，并且避免把东西卷入其中。所有的操作应该在距离前面的格栅约10厘米以内的工作面上进行。

　　4、操作时应动作缓慢，减少不必要的手和手臂伸进和伸出空气屏障，以免影响气流。

　　5、工作台在操作时，应尽量减少实验室内开门、关门，人员走动等情况，以免影响室内气流。

　　6、通常情况下，在生物安全柜里面不要使用酒精灯或类似的明火，因为他们会破坏气流模式、损坏HEPA过滤器，并且有火灾的危险（除非有特殊的要求）。

　　7、警报灯或警铃响时切勿继续操作。

　　8、一旦工作台在操作时出现意外事故，须在这些东西搬出之前，连同工作台在内进行全面消毒，如果溢出的污水或液体集中在排液槽中，必须采取紧急措施将污水排出。同时填写《实验室潜在危险材料

　　溢出或浅出记录》。

　　9、试验结束后将试验物品移出生物安全柜，不得将生物安全柜当成储物箱。

九、维护保养

　　1、当生物安全柜移动后或实验室布局改动时，应该由有经验的工作人员对生物安全柜的屏障作用重新进行测试。

　　2、半年一次生物安全柜内沉降菌检测：生物安全柜消毒清洁后，紫外线照射30分钟，开前门通风10分钟后，于工作台面中部均匀放置两块已制好、经检验无菌的普通营养琼脂培养皿，打开培养皿盖，使

　　培养基表面暴露30分钟，再将培养皿盖盖上后倒置，取出放36℃培养箱培养24小时以上，用肉眼直接进行菌落计数，以≤1为合格。

　　3、检查前玻璃驱动装置的松紧度。

　　4、每年请厂商对生物安全柜进行风速、洁净度检测一次。

　　5、根据需要更换紫外灯管和照明灯管。杀菌灯工作超过一定时间后会失去效果，当工作台灯照强度低于每平方厘米40微瓦时，就应更换新的杀菌灯。（可用紫外线灯表来测定工作台表面的灯照强度）

　　6、应根据需要更换高效过滤器（HEPA），由专业人员进行操作。（高效空气过滤器的寿命取决于如何使用它。在实验室的正常条件下，可以预测本过滤器至少可以使用五年。）

　　7、在开始工作之前要让生物安全柜的风机至少运行3-5分钟使生物安全柜内的空气进行净化。

　　8、定期对生物安全柜的工作台面、内壁（不包括送风滤器扩散板）和观察窗的内表面用消毒剂（75%酒精或1g/L有效氯）擦拭。再用无菌蒸馏水进行擦拭以清除残余的消毒剂。

　　9、注意避免物品或液体进入格栅下面。经常用柔性的清洁剂或玻璃专用清洁剂清洗箱体外表面和玻璃。

　　10、每月消毒一次工作台下面的托盘。

　　2018年12月8日